Örverufræðilegar aðferðir rannsókn á vatns, jarðvegs og loft

Örverur - pínulítill, aðallega einn-celled skepnur, sem eru útbreidd í náttúrunni. Þau finnast í öllum fjölmiðlum (loft, jarðveg, vatn) í mönnum og dýrum, í plöntum.

Eigindlegar fjölbreytni og fjölda lífvera ráðast fyrst og fremst á næringargildi efnasambönd. En það er líka mikilvægt og raka, hita, loftun og áhrif sólarljóss og öðrum þáttum.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Aðferðir til að málningu og Örverufræðilegar rannsóknir náttúrulega fjölmiðla er hægt að greina tilvist sýkla og til að ákvarða magn þeirra í samræmi við Eftirfarandi niðurstöður fengust:, til að þróa ráðstafanir til að fjarlægja eða koma í veg fyrir smitsjúkdóma. Að auki, magn reikningur er þörf fyrir vistkerfa reiknilíkönum og þróun náttúrulegum ferlum stjórnarhætti. . Skulum við íhuga nánar hvað eru aðferðir við örverufræðilega rannsókn.

jarðvegi

Það er talin af fræðimönnum sem einn af mögulegum leiðum til að sending af völdum sýkinga pathologies. Með seyti sjúklingi sem þess jarðvegi smogið sjúkdómsvalda manna eða dýra. Sumir þeirra, einkum, Spore, getur varað í jarðvegi í langan tíma (stundum áratugum). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Í jarðvegi falla Sýkingarvaldana svo hættulegt sýkingar, til dæmis stífkrampa, miltisbrandur, bótúlíneitrun, og svo framvegis. Aðferðir við málningu-örverufræðilegu rannsókn á jarðvegi er hægt að tilgreina "örveru telja" (fjölda örvera í jarðvegi úr grammi), og coli vísitölu (úr fjölda E. coli) .

Jarðvegur Greining: An Overview

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Aðferðir til örvera athugun á jarðvegi skal fyrst og fremst rekja beint smásjárrannsókn og menningu á traustum næringaræti. Stofnar örvera og hópa þeirra sem búa jarðveginn, mismunandi á flokkun stöðu og vistfræðilegum aðgerðir. Í vísindum, eru þeir sameinaðir undir almenna heitinu "jarðvegi lífríki." Grunnur - búsvæði gríðarstór tala af örverum. Í hvert gramm af jarðvegi er til staðar 1-10 milljörðum frumum sínum. Í þessu umhverfi, virkan tekur rotnun lífræns efnis, með þátttöku ýmissa saprophytic örvera.

Smásjá Rannsóknir á örverufræðilegum aðferð: the stíga

Greining á miðli hefst með sýnatöku. Í þessu skyni, áður skrældar og ostur áfengi hníf (skófla er hægt að nota). Eftir það, undirbúningur sýnis. Næsta skref - að telja frumum litaðar smears. Íhuga hvert skref fyrir sig.

sampling

Í greiningu á nytjajarðvegi hafa tekin úr dýpi öllu lag. Fyrsta fjarlægt 2-3 cm fyrir ofan jörðu, þar sem það getur verið til staðar í óviðkomandi örveruflóru. Eftir það, með svæði jarðar rannsökuð taka Monoliths. Lengd hvert þeirra skal vera í samræmi við þykkt lag sem þú vilt prófa.

Á lóð 100-200 sq. 7-10 m völdum sýnum. Vægi hvers - af stærðargráðunni 0,5 kg. Sýnin skulu blandað vandlega í poka. Þá taka meðaltal sýni, sem vegur um það bil 1 kg. Það ætti að vera sett í verkað (dauðhreinsað) pakkanum fylgir í klút poka. Áður beina greiningu á sýninu geymd í kæli.

Survey Preparation

The hrært jarðvegi hellt á þurru gler. Þess fyrirfram þurrka með áfengi og brenna ofan brennara. Með spaða jarðvegi blanda vel og stækkað jafnt. Það er skylda að fjarlægja rætur og öðrum erlendum þáttum. Til að gera þetta, nota tweezers. Áður rekstur tweezers og spaða ofan brennara kveikti og leyft að kólna.

Af ýmsu Lóðir jarðvegi dreift á gler, valin litlum skömmtum. Þeir vigtuð f postulíni fat á tækniskala. является специальная обработка образца. Nauðsynlegur skref smásjárskoðun Aðferðin úr Örverufræðilegar rannsóknir er sérstakur vinnsla á sýninu. 2 verður að vera tilbúinn fyrirfram, dauðhreinsuðu kolbu. stærð þeirra ætti ekki að vera meiri en 250 ml. Eitt af því sem glös er hellt í 100 ml af kranavatni. Vegna þess að það tekur 0,4-0,8 ml af vökva sýni úr jarðvegi og gerð rök í deig. Blöndunni á að nudda með fingri eða gúmmíi stauti í 5 mínútur.

Vatn frá fyrstu kolbuna var flutt f jarðvegi massa tómt kolbu. Ennfremur, nudda hana aftur. Eftir þetta massi er flutt í flösku sem hafði nálægt Brennsluloginn. Container með jarðvegi fjöðrun shaken on a hristara I 5 mín. Eftir það var hún látin setjast í um 30 sekúndur. Þetta er nauðsynlegt til þess að leyfa stórar agnir setjast. Eftir hálfa mínútu massi er notað til að framleiða einangraða undirbúning.

Frumna á föstum smears

, разработанному Виноградским. Bein smásjá rannsókn á jarðvegi fer fram með aðferð örverufræðilegum rannsóknum, þróað Vinogradskii. In ákveðnu rúmmáli af grugglausninni var reiknað það fjölda frumna örvera. Nám fasta smears getur geymt lyf í langan tíma og framkvæma útreikninga á hverjum tíma.

Undirbúningur Lyfið eins og hér segir. A tiltekið magn af slurry (sem er oftast 0.02-0.05 ml) er beitt með micropipette inná renna. Við þessa lausn var bætt við dropa af agar-agar (fjölsykra agaropectin blöndu og agarósa dregin út úr brúnum og rauðu þörungum Svartahafs), hrært hratt og dreift yfir svæði 4-6 sq. cm. Pap loft-þurrkaðir og fast í 20-30 mínútur. alkóhól (96%). Næst, lyfsins vætt með eimuðu vatni og sett í p-p carbolic erythrosine 20-30 mín.

Eftir litun, er það þvegið og þurrkað í lofti. Frumna gerðar úr immersion linsu.

Sáning á traustum miðlum

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Smásjá aðferðir til örverufræðilegu prófi geta uppgötva fjölda örvera. En þrátt fyrir þetta, aðferð við sáningu er algengasta í reynd. Kjarni hennar samanstendur í seeding magn af lyfinu í (jarðvegi, dreifu) in a ræktunarskál á fast miðil.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Þessi aðferð við örverufræðilegar rannsóknir tekur tillit ekki aðeins magn en einnig í hópinn, og í sumum tilfellum, og tegundir samsetningu smásjá gróður. Að telja fjölda þyrpingar sem framleidd eru, yfirleitt frá the botn af the Petri skálinni í senda ljós. Á reiknað svæðið sett falið eða blek punktur.

vatn Analysis

Microflora á vatni líkamans, að jafnaði, endurspeglar örvera samsetningu jarðvegs í kringum hana. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Í þessu samhengi eru aðferðir málningu-örverufræðilegar greiningar á vatni og jarðvegi sérlega hagnýt mikilvægt í rannsókn á stöðu tiltekins vistkerfis. The ferskt vatn inniheldur, að jafnaði, cocci, stangir-lagaður bakteríum.

Loftfælnar í vatni í litlu magni. Sem reglu, margfalda þau neðst vatnshlota, í drullu, taka þátt í því ferli hreinsun. Örveruflóruna hafsins og höf á hagkvæman hátt fulltrúa halophytic (halophilic) bakteríur.

Í vatninu eru Artesian brunna nánast engar örverur. Þetta er vegna þess að sía getu jarðvegs lag.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Bundnar aðferðir við að örverufræðilegu rannsókna vatni, sem telst skilgreiningu á skránni if-örveru og coli--títrunar eða. Fyrsti vísirinn skilgreinir fjölda baktería í 1 mL af vökva. Coli vísitölu táknar fjölda kólígerla til staðar eru í lítra af vatni, og ef títra - lágmarks fjölda eða hámarki útþynningar vökva, þar sem þeir geta enn hægt að uppgötva.

Ákvörðun örverum númer

Þessi aðferð Sanitary örverufræðilegra rannsókna á vatns er sem hér segir. F 1 ml af vatni er ákvarðað fjöldi miðsæknar og facultattvé loftfælnar (Millie & ii) loftháðar fær um að á kjöti-peptón agar (aðal miðill) at 37 ° C. á daginn til þess að mynda þyrpingar sýnilegur viö stækkun sem nemur 2-5 p. eða berum augum.

является посев. The lykill skref aðferðarinnar úr örverufræðilega greiningu inn vatni, er sáð. Vegna þess að hver sýnið er sáð að minnsta kosti 2 mismunandi rúmmál. Þegar Bankaðu á vatn greiningu í hvort glas er gert úr 1-0.1 ml af hreinu vökva og mengað 0.01-0.001 ml. Á til að sá 0,1 ml eða minna að rúmmáli af vökva er þynnt með eimuðu (dauðhreinsað) vatni. Stöðugt undirbúa aukastafi þynningum. 1 ml af hvert þeirra er gerð í tveimur ræktunarskálunum.

Breeding fyllt með næringarefna agar. Það verður að fyrst brætt, og kælt niður í 45 ° C. Eftir að hrært hafði verið, er virka miðlinum til vinstri á láréttum fleti fyrir fast. At 37 gráður. nytjaplöntur eru ræktaðar allan daginn. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. The talið Aðferðin úr örverufræðilegu rannsóknum vatni tekur mið árangur þeirrar rétti þar sem fjölda þyrpinga í bilinu 30 til 300 pm.

loft

Það er talið flutning jörð fyrir örverur. являются седиментация (оседание) и аспирация. Helstu aðferðir við Örverufræðilegar rannsóknir eru loft setmyndun (set verður) og ásvelging.

Microflora loft umhverfi er geðþótta skipt í breytu og stöðug. Fyrsti hópurinn inniheldur ger, litmyndandi Cocci, gró-fas Bacillus coli og öðrum örverum sem eru ónæmir fyrir þurrkun, útsetningu fyrir ljósi. Fulltrúar breyta örveruflóru, rúms í loftið frá venjulegum heimkynnum sínum, lengi halda orku þeirra.

Í loftinu stórum borgum örvera miklu meira en í loftinu umhverfi dreifbýli. Um haf, eru skógar mjög fáir bakteríur. Loft hreinsun auðvelda Úrkoma: snjór og rigning. Innanhúss örverur miklu meira en í opnum rýmum. fjöldi þeirra eykst í vetur í fjarveru reglulega loftræstingu.

setmyndun

считается простейшим. Þessi aðferð við örverufræðilegar rannsóknir í örverufræði er talin vera einfaldasta. Þetta er byggt á uppgjör á smádropunum og agnir á agar flöt á opnu petrískálar loftsogs. setmyndun aðferð getur ekki nákvæmlega ákvarða fjölda af bakteríum í loftinu. Staðreyndin er sú að í opnu bolla til að veiða fína brot á rykagnirnar og dropar af bakteríu alveg erfitt. Á yfirborðinu haldið aðallega stórar agnir.

Þessi aðferð er ekki notuð til greiningar lofti. Þetta umhverfi sem einkennist af miklum sveiflum í hraða flæði lofts. Setmyndun má þó nota í fjarveru flóknari tækja eða rafmagns aflgjafa.

Að ákvarða fjölda örveru flutt af Omelyansky aðferð. Til samræmis í 5 mínútur á með yfirborðsflatarmál uppá 100 ferningur agar. cm sest a fjöldi baktería er til staðar í 10 lítra af lofti.

Pantaðu 535 "On sameiningu örverufræðilegum aðferðum rannsóknar"

Með bakteríu- greining gegnir mikilvægu hlutverki í því flókna klínískum og ransóknarstofustaðfestingum starfsemi sem miða að því að greina, fyrirbyggja og meðhöndlunar á ýmsum smitsjúkdómum. Hins vegar er rannsókn á umhverfi, sem þeir eru ekki takmörkuð.

Sérstaklega mikilvægt er að sýkla greining af líffræðilegu efni á sjúkrahúsum. Til rannsókna sem gerð var í aðstöðu heilsu, aukið kröfur. Tilgangur Order "um sameiningu örverufræðilegum aðferðum við rannsókn" er að bæta með bakteríu- greiningu, bæta gæði og skilvirkni ræktunar greiningu.

Smásjárrannsókn á smears í konum

Það er lykillinn greiningaraðferð til sjúkdómsgreiningar á sýkingum, kynsjúkdóma sýkingum, og tækifærissýkingar (tækifærissýkingum bakteríum).

Smásjárgreiningu til þess að meta efnislega og tölulega samsetningu af microflora, athuga réttmæti sýnatöku. Til dæmis, að viðstöddum þekjuvefs í leggöngum í swabs sem tekin eru úr úr leghálsi, gefur til kynna a brot af reglum vali á lífssýni.

Það er sagt að örverufræðileg rannsókn í þessu tilfelli er yfirleitt fylgt af sumum vandamálum. Þeir tengjast þeirri staðreynd að í neðri kynfærum er venjulega til staðar fjölbreytt microflora sem breytist á mismunandi aldri. Til að bæta skilvirkni rannsókna og hafa þróað stöðluð reglum.

Greining á veirusýkingum

Það er framkvæmt með aðferðum sem eru að skynja RNA og DNA sýkla. Þær byggjast fyrst og fremst á ákvörðun á kirnisröðum sjúklegum efni. Í þessu skyni, sameinda rannsaka. Þau eru tilbúnar framleitt kjarnsýrur til fyllingar (uppbætandi við) The veiru sýrur merktu með geislavirkri merkimiða eða bíótín.

The gæði af aðferðinni er endurtekið því að afrita tiltekna DNA brotið sem innihélt nokkra hundruð (eða tugir) kirni sem pör. afritunar (afrita) er að framlenging getur byrjað aðeins í ákveðnum einingum. grunnur (grunnur) er notað til að búa til þá. Þau eru tilbúið fákimi.

PCR Diagnostics (polymerase chain reaction) er einföld í framkvæmd. Þessi aðferð leyfir þér að fljótt að fá niðurstöðu með því að nota lítið magn af sjúklegri efni. Með PCR greiningu bent bráðum, langvinnum og til þess að undirliggjandi (falið) sýkingum.

Þegar næmi aðferðarinnar er talið meira æskilegt. Hins vegar eru núverandi kerfi próf ekki áreiðanleg nóg, þannig að PCR greining getur ekki alveg skipta hefðbundnum aðferðum.