Sermisviðbrögð: tegundir, notkun

Greining á rannsóknarstofu á næstum öllum smitsjúkdómum byggist á því að greina mótefni í blóði sjúklingsins, sem eru þróuð fyrir mótefnavaka sjúkdómsins, með aðferðum við sermisviðbrögð. Þeir fóru í læknishjálp frá seint á nítjándu - byrjun tuttugustu aldarinnar.

Þróun vísinda hjálpaði til að ákvarða mótefnafræðilega uppbyggingu örvera og efnaformúlur eiturefna sinna. Þetta leyfði að búa til ekki aðeins lækninga, heldur einnig sjúkdómsgreiningar. Þau eru fengin með því að kynna veikburða sýkla í rannsóknardýra. Eftir nokkra daga útsetningu úr blóði kanínum eða músa eru efnablöndur sem notaðar eru til að auðkenna örverur eða eiturefni þeirra búnir til með því að nota sermisviðbrögð.

Ytri birtingarmynd slíkrar viðbragðs fer eftir skilyrðum samsetningarinnar og ástandi mótefnavaka í blóði sjúklingsins. Ef agnir af örverum eru óleysanlegir, þá falla þær niður, lýsa, binda eða binda í sermi. Ef mótefnavakar eru leysanlegar, þá kemur fyrirbæri hlutleysingar eða úrkomu fram.

The agglutination viðbrögð (PA)

Sermifræðileg viðbrögð agglutination er mjög sérstakur. Það er einfalt í framkvæmd og er nægilega skýrt til að ákvarða fljótt mótefnið í sermi sjúklingsins. Það er notað til að útbúa viðbrögð Vidal (greining á taugaveiki og slagæðabólgu) og Weigl (tyfusýki).

Það byggist á sértækum samskiptum manna mótefna (eða agglutinins) og örvera frumna (agglutinogen). Eftir samskipti þeirra myndast agnir sem falla niður. Þetta er jákvætt tákn. Lifandi eða dánar örveruefni, sveppir, frumdýr, blóðfrumur og sumarfrumur geta verið notaðir til að móta hvarfið .

Efnafræðilega er hvarfið skipt í tvo þrep:

1. Sértæk efnasamband mótefna (AT) með mótefnavaka (AH).
2. Ósértæk - útfelling samhverfa AG-AT, þ.e. myndun agglutats.

Viðbrögð óbeinrar agglutination (RPHA)

Þessi viðbrögð eru næmari en fyrri. Það er notað til að greina sjúkdóma sem orsakast af bakteríum, innanfrumumyndum, protozoa. Það er svo sérstakt að það geti greint jafnvel mjög lágt styrk mótefna.

Til að framleiða það, notum við hreinsað lömbakrótein og rauð blóðkorn manns, sem fyrirhugað er með mótefnum eða mótefnavökum (þetta fer eftir því sem lab-tæknimaðurinn vill finna). Í sumum tilfellum eru rauðkornavaka hjá sjúklingum með ónæmisglóbúlín. Sermisbreytingar rauðkorna eru talin hafa átt sér stað ef þau hafa komið fyrir á botni prófunarrörsins. Jákvæð viðbrögð má segja þegar frumurnar eru gerðar í formi hvolfs regnhlíf, sem tekur alla botninn. Neikvæð viðbrögð eru talin ef rauðir blóðkornar hafa komið upp í dálki eða í formi hnapps í miðju botnsins.

Úrkoma viðbrögð (RP)

Sermisviðbrögð af þessari gerð þjóna til að greina mjög lítil mótefnavaka agnir. Þetta getur verið til dæmis prótein (eða hlutar þess), prótein efnasambönd með fituefni eða kolvetni, hluta baktería og eiturefna þeirra.

Sera til að framkvæma viðbrögðin eru fengin með tilbúnum sýktum dýrum, venjulega kanínum. Þessi aðferð er hægt að fá algerlega útfellda sermi. Stöðugleikaröðunarhvarfssvörunin er svipuð verkunarháttur á agglutinunarviðbrögðum. Mótefni sem eru í sermi sameinast mótefnavaka í kolloidalausn, sem mynda stór prótein sameindir sem eru afhentar á botni rörsins eða á undirlag (gel). Þessi aðferð er talin mjög sértæk og getur greint jafnvel óverulegt magn af efni.

Notað til að greina plága, tularemia, miltisbólgu, heilahimnubólgu og aðrar sjúkdómar. Að auki tekur hann þátt í réttar læknisskoðun.

Hreinsun úr hlaupi

Sermisviðbrögð geta farið fram ekki aðeins í fljótandi miðli, heldur einnig í agarhlaupi. Þetta er kallað dreifður úrkoma. Með hjálp sinni er samsetning flókinna mótefnavaka blöndu rannsökuð. Þessi aðferð byggist á mótefnavaka mótefnavaka gegn mótefnum og öfugt. Í hlaupinu fara þau í átt að hver öðrum á mismunandi hraða og funda mynda úrkomulínur. Hver lína er eitt sett af AG-AT.

Viðbrögð við hlutleysingu exotoxins við móteituroxín (PH)

Andoxunarsýrur geta dregið úr áhrifum exotoxins sem framleiða örverur. Þetta er grundvöllur þessara sermisviðbragða. Örverufræði notar þessa aðferð til að títra sermi, eiturefni og toxóíð, svo og að ákvarða meðferðaráhrif þeirra. Hlutleysing eiturefna er ákvörðuð með hefðbundnum einingum - AE.

Þar að auki er hægt að ákvarða tiltekna eða dæmigerða aukabúnað exotoxins vegna þessa viðbrögðar. Þetta er notað við greiningu á stífkrampa, barnaveiki, bólgu. Rannsóknin er hægt að framkvæma bæði "á glerinu" og í hlaupinu.

Ljósviðbrögðin (RL)

Ónæmissermi, sem kemur inn í líkama sjúklingsins, hefur, auk þess sem aðalvirkni passive ónæmis, einnig lýsandi eiginleika. Það er fær um að leysa upp örverueyðandi efni, frumu erlendra þætti og vírusa sem koma inn í líkama sjúklingsins. Það fer eftir einangrun mótefna í sermi, bakteríólýsínin, cýtólýsín, spíróhetholýsín, hemólysín og aðrir eru einangraðar.

Þessar sértæku mótefni eru kallaðir "viðbót". Það er að finna í nánast öllum líkamsvökva, hefur flókið prótein uppbyggingu og er mjög viðkvæm fyrir hita, hristi, sýru og beinu sólarljósi. En í þurrkaðri stöðu er hægt að viðhalda lýsandi eiginleika í allt að sex mánuði.

Það eru tegundir af sermisviðbrögðum af þessu tagi:

- bakteríulosun

- hemolysis

Bakteríulosun er framkvæmd með blóðsermi sjúklings og tiltekið ónæmissermi með lifandi örverum. Ef nægilegt magn af viðbót í blóði er, mun rannsóknaraðili sjá bakteríulyfið og viðbrögðin verða talin jákvæð.

Annað blóðþrýstingslækkun blóðsins er að blóðþurrðarsjúkdómur sjúklingsins sé meðhöndlaðir með blóðvökva sem innihalda blóðsykur, sem eru aðeins virkjaðar í viðurvist tiltekins hrós. Ef það er einn, fylgir rannsóknaraðstoðarmaður lausn rauðra blóðkorna. Þessi viðbrögð eru mikið notaðar í nútíma læknisfræði til að ákvarða viðbótartiterið (þ.e. minnsta magn þess sem veldur ljósi rauðra blóðkorna) í sermi og til greiningar á bindiefni. Þetta er hvernig serologic svörunin fer fram - Wasserman viðbrögðin.

The viðbót fixation viðbrögð (RCC)

Þessi viðbrögð eru notuð til að greina í blóðsermi sjúklinga mótefni gegn smitandi efni og einnig til að greina sjúkdómsvaldið frá mótefnafræðilegum uppbyggingu þess.

Hingað til höfum við lýst einföldum sermisviðbrögðum. RSK er talið flókið viðbrögð, vegna þess að það hefur ekki áhrif á tvær, en með þremur þáttum: mótefni, mótefnavaka og viðbót. Kjarni hennar liggur í þeirri staðreynd að samspil mótefnisins og mótefnavaka kemur aðeins fram í nærveru viðbótarefnisins, sem eru aðsogað á yfirborði myndaðs AG-AT flókins.

Mótefnin sjálfir, eftir að viðbótin er bætt við, gangast undir verulegar breytingar sem gefa til kynna gæði viðbrotsins. Það getur verið ljósi, hemolysis, immobilization, bakteríudrepandi eða bakteríustillandi verkun.

Viðbrögðin sjálfar eiga sér stað í tveimur áföngum:

1. Myndun mótefnavaka mótefnavaka flókinnar, sem er sjónrænt ósýnilegt fyrir rannsóknaraðila.
2. Mótefnabreytingin breytist undir aðgerð viðbótar. Þessi áfangi er oft hægt að rekja til bláða auga. Ef sjónrænt svar er ekki sýnilegt er viðbótarvísir kerfi notað til að greina breytingar.

Vísirkerfi

Þessi viðbrögð eru byggð á bindandi viðbót. Í prófunarrörinu einni klukkustund eftir DSC samsetninguna er bætt hreinsað rauðkorni af hrútinu og óbundið blóðsýru sermi. Ef það var óbundið viðbót í túpunni, mun það taka þátt í AG-AT flókið sem myndast á milli kjötfrumna í blóðinu og hemólysíni og valda upplausn þeirra. Þetta þýðir að RCC er neikvætt. Ef rauðir blóðfrumur héldust óbreyttir, þá, hver um sig, er hvarfið jákvætt.

The hemagglutination viðbrögð (RGA)

Það eru tveir í grundvallaratriðum mismunandi hemagglutination viðbrögð. Einn þeirra er serologic, það er notað til að ákvarða blóðflokka. Í þessu tilfelli eru rauðkornavökvi samskipti við mótefni.

Og seinni viðbrögðin vísa ekki til sermis, þar sem rauð blóðkorn bregðast við hemagglútínínum sem veiran framleiðir. Þar sem hver umboðsmaður starfar eingöngu á ákveðnum rauðkornum (kjúklingi, lambi, apa), þá er hægt að líta svo á að þessi viðbrögð séu þröngt sértæk.

Skilið, jákvæð viðbrögð eða neikvæð, þú getur með því að staðsetja blóðfrumur neðst á prófunarrörinu. Ef myndin líkist innhverfri regnhlíf, þá er viðkomandi veira til staðar í blóði sjúklingsins. Og ef öll rauð blóðkorn eru mynduð eins og myntasúlur, þá eru engar óþekktar sýkingar.

Viðbrögðin við hömlun á hemagglutination (RTGA)

Þetta er mjög sértæk viðbrögð sem gerir þér kleift að ákvarða tegund, tegund veira eða tilvist tiltekinna mótefna í blóðsermi sjúklingsins.

Kjarni hennar liggur í þeirri staðreynd að mótefnin, sem eru bætt við prófunarrörinn með prófunarefninu, koma í veg fyrir að mótefnavökvani komist á rauða blóðkorna og stöðva þá hemagglutination. Þetta er eigindleg vísbending um nærveru tiltekinna mótefnavaka í blóði til sérstakrar eftirsóttu veiru.

Viðbrögðin við ónæmisflúrljómun (RIF)

Viðbrögðin byggjast á getu til að greina AG-AT flókna í luminescent smásjá eftir meðferð með flúorkrómískum litum. Þessi aðferð er auðvelt að meðhöndla, þarf ekki úthlutun hreinnar menningar og tekur smá tíma. Það er ómissandi fyrir hraðri greiningu á smitsjúkdómum.

Í reynd eru þessar sermisviðbrögð skipt í tvo gerðir: bein og óbein.

Bein RIF er framleitt með mótefnavaka sem er fyrirhöndlað með blómstrandi sermi. Og óbeint er lyfið fyrst meðhöndlað með hefðbundnum greiningarvörum sem innihalda mótefnavaka í viðeigandi mótefni og síðan er luminescent sermi, sem er sértækur fyrir prótein AG-AT flókinnar, ný á ný og örverufrumurnar verða áberandi með smásjá.