Molecular Diagnostics: rauntíma PCR

Eins og er, Molecular Diagnostics vélbúnaður sem ætlað er keðjuverkandi fjölliðun DNA (PCR), þar sem var hvati fyrir þróun fjölda aðferðir við greiningu sjúkdóma, byggt á ákvörðun á erfðafræðilegu efni. TIL AÐ FRAMKVÆMA rauntíma PCR með því að nota gen bútinn (einkum við kjarnasýruna) af orsakavald, sem er ekki að finna í öðrum einstaklingum.

Meginreglan um PCR er margföldun af ákveðinni sjúkdómsvaldur DNA brotið milljón sinnum með DNA-pólýmerasa í sérstökum einingu, sem vísað er til sem varma cycler, sem veitir þar af leiðandi hringað endurtekningu á hitastig stjórn fyrir gefið program.

Greining PCR gerir að endurtaka röð amplifications, viðhalda virkni ensíma. Þegar mögnun fer fram vel, í einni lotu fjölda eintaka af tiltekinni stykki af DNA sýklinum tvöfaldar, eftir þrjátíu umferðir - hundrað og tíu. Það er ástæðan fyrir PCR er notað í greiningu til að ákvarða nógu lítill sýkla, að bera kennsl á sem er ómögulegt án þess.

Það skal tekið fram að RNA getur ekki verið sniðmát fyrir PCR í rauntíma. Þess vegna, til þess að uppgötva veiru RNA áður til við mögnunina til að fá DNA fylgni við samsvarandi fragment of henni. The keðjuverkandi fjölliðun DNA gerir að framleiða DNA og RNA mælingu sjúkdómsvald. Þær upplýsingar sem þannig fæst, er notað til að fylgjast með árangur af meðferðinni notaðar voru, og mat á klínísku batahorfur.

Að auki, í rauntíma PCR þarf ekki frekari aðgerðir með tilliti til decryption af miða DNA eða amplicons, sem þjóna sem hindrun rétta greiningu og leiða til rangra niðurstaðna. Þessi aðferð gerir það mögulegt að nota ekki Electrophoresis skref, sem leiðir til þess að hætta á-minnkun afurðir úr næstu polymerase chain reaction. Einnig, vegna lækkunar á fjölda misnotkun með umboðsmanni, dregur úr þeim tíma af könnuninni, það einfaldar ferlið, dregur úr líkum á villum. PCR leyfir þér einnig að tilgreina fyrstu fjölda eintaka af DNA sjúkdómsvalda í klínískri rannsókn til að bera kennsl tímabil versnun og að taka tímanlega ráðstafanir til að lækna sjúklinginn.

Í dag there ert a stór tala af mögnun aðferðir við upptöku í rauntíma. Algengast var að ýmsar aðferðir beita amplicon fylgni við flúróljómandi rannsaka geislun styrkleiki sem er breytilegt eftir uppsöfnun amplicon og skráð í rauntíma með sérstöku tæki sem kallast thermocycler með optical mát. Það afla a hár láréttur flötur af næmi í greiningu. Á sama PCR afurð er hægt að uppgötva, ásamt miklu magni aukaafurða, á þeim tíma þegar rafdrætti það í sumum tilfellum er ekki tekið.

Með PCR með jákvæðum og neikvæðum stjórna sýni í rauntíma. Svona, jákvæð og neikvæð sýni óskast í rannsókn greindar sem aðskildar sýnum, viðmiðunarsýnis, þar sem er kynnt í hverju þessara sýni og fer f öllum greiningum skrefum.

Í dag, there ert a stór tala af tæki fyrir framkvæmd the keðjuverkandi fjölliðunar. Meðal þeirra eru Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid og Roche. Hver þeirra hefur sína kosti og galla

Það skal tekið fram að PCR - aðferð við greiningu notað í stórum stíl vísinda, rannsókna og greiningar miðstöðvar um allan heim, vegna þess að það gefur tækifæri til að framkvæma strax túlkun á niðurstöðum.